冷胁迫是的影响农果树生产产量的常见氛围挑戰之中。钙依懒性蛋白酶激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）表现传递信息到上皮细胞并缴活对顺境回复的重要的改善细胞，但其监测制度尚不清。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷酸性反应呈现位点的拜谱生物。

英文翻译主题：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

汉语标题文字：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

雇主组织：浙江大学

学习板材：番茄

拜谱提供数据工艺：磷硝化作用体现位点验测

设计构思：

一、学习然而

1、CPK27在超高温胁迫下展示调涨，若想增加茎秆抗冻性

已往科研表示，CPK27在冷胁迫条件下取决于上涨。为核验哪一毕竟，下面中作著在使用CPK27的的两个敲除突变性系（cpk27 #2，#6）采取耐冷性测试测试，察觉CPK27的转录平均能力更为明显大于照表组（图1a-b）。在CPK27取决于被可以抑制的植被中，对耐冷性的怎强效应更为明显下降。进几步的亚组织内部市场定位与激活开通科研表示，冷胁迫开展CPK27向组织内部核日常积累，并怎强其磷硝化用处平均能力（图1 f）。免疫性痕迹具体分析进几步否认冷胁迫成脂 CPK27 在核内蛋白质丰度多、胞内丰度变少，外源CaCl₂清理可组成部分可以恢复cpk27的冷的敏感表型，表示CPK27依赖性Ca²⁺4g信号充分利用效应。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺依赖性策略强化番茄耐低温性

2、CPK27借助政策调控黄吩噻嗪分解成路线化解环境温度板材损害

转录组测序成果系统提示 ，CPK27的过展现更为明显调整黄吩噻嗪生物技术分解成有关的基因遗传遗传，如CHS、CHI和FLS等，同样黄吩噻嗪基础代谢信号通路更为明显丰度。而CPK27突然变化体中某些基因遗传遗传展现下降，系统提示CPK27实现利于黄吩噻嗪分解成助力主茎调理超高温胁迫造成的氧化的负担（图2a-e）。

图2 RNA-seq讲解CPK27宏观调控的冷响应的基因组

3、HY5是CPK27介导的抗寒数据信号环路中的最为关键的靶标

为认可 CPK27 与 HY5 的彼此角色，写作者先是开始了酵母菌双混种（Y2H）科学實驗，数据确认双方会出现彼此角色（图3a）。双碳原子荧光主动依存（BiFC）科学實驗逐渐一个脚印意味着CPK27 与 HY5 在人体细胞结构内时有发生彼此角色（图 3b）。其次可以通过免疫性共积累等技巧，察觉到HY5与CPK27在树种里面会出现彼此角色，且双方的彼此角色兼有钙化合物（Ca²⁺）忽略性（图 3c）。不仅而且，在Co-IP科学實驗的核蛋白抽取前增加冷胁迫治理，数据屏幕上显示冷胁迫可减弱HY5与CPK27的彼此角色（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷过酸其至关重要位点

4、CPK27磷过酸HY5提高其转录抗逆性，驱动黄大环内酯dna表达出

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷碱化淡化位点检查，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷酸性反应HY5并增进其平稳性

5、CPK27 在类黄酮生物制品合成视频信号通路中影响于HY5的中上游

综和染色体抒发和排泄物概述导致（图5），CPK27在冷胁迫反映环节中功能于HY5的长江上游，能够 调节作用 HY5 介导的类黄酮怪物人工径路会影响值物耐旱性。

图5 CPK27用处于HY5中下游

二、散文个人心得体会

综合上面的根据上述，文中探索声明CPK27磷硝化作用突显HY5蛋白质，激活码类黄酮自动合成手段，使得抗硫化东西积淀，行而改善耐冷实力。该探索表明了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联政策调控考核机制（图6），声明CPK27介导的HY5磷硝化作用是衔接钙电磁波与次生分解代谢暴击的首要方式，为正确理解仿真植物苦难相应电脑网络展示了新感觉。

图6 CPK27-HY5引擎升高值物受冷胁迫的工作机制

三、拜谱个人心得体会

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的淀粉酶质组学、掩盖淀粉酶质组学、产生组学、转录组学等两组学品牌技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

参考资料文章：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134